阿维菌素类药物残留测定方法（一）

[db:作者] / 2022-12-26 00:00

21.1.4.2 测定方法

目前有关动物源基质中AVMs的残留检测方法主要有免疫学方法(IA)、薄层色谱法(TLC)气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱联用法(LC-MS)等，而HPLC和LC-MS是国际上应用最广泛的AVMs残留分析方法。

(1)薄层色谱法(thin layer chromatography，TLC)

TLC系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的Rf作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。Malanikova等运用TLC方法测定了AVMs含量。将样品点样在涂有一层荧光指示物质的硅胶板上，硅胶板用正己烷-丙酮-乙腈溶液或正己烷-异丙醇-甲醇展开30～40min后，在254nm波长下进行扫描仪定量检测。AVM B1a、B1b与同族的B2、A、A2合并成同一个峰被检测出来。该方法的LOD小于4ug/kg。Hoy等报道了一种用于研究大西洋鲑鱼中IVM体内分布的TLC快速筛选测定方法。硅胶板涂有荧光指示物质，展开剂为氯仿-乙酸乙酯-甲醇-二氯甲烷，在波长254nm下，用紫外检测器进行检测。

(2)气相色谱-质谱法(gas chromatography- mass spectrometry，GC-MS)

GC-MS是残留分析中常用的确证技术。但由于AVMs分子量大，极难气化，所以要采用GC分析，就必须先进行衍生化。实际检验中采用GC分析的文献非常少。Sanbonsuge等报道了采用GC-MS测定马肉中IVM的残留分析方法。提取的分析物用四氯化碳溶解，室温下以1-甲基咪唑为催化剂，与N，O-双(三甲硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)衍生化反应5min，生成IVM的三甲基硅(TMS)衍生物(IVM-TMS)，再进GC-MS分析。采用电子轰击电离(EI)源，选择离子监测(SIM)模式，检测m/z185离子，以氘代二苯甲酮为内标定量。该方法LOD为0.67ng/g，回收率与LC-MS方法相近。同时，EPR和MOX也可以采用类似方法检测，其LOD分别为3.72ng/g和5.44ng/g。

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