阿维菌素类药物残留测定方法（四）

[db:作者] / 2022-12-26 00:00

(5)免疫分析法(immunoassay，IA)

IA与仪器方法不同，它具有高度的选择性和灵敏度，可使分析过程简化，适合复杂基质中痕量组分的分析，它的基本原理是利用抗原-抗体的特异性反应，AVMs分析中主要有酶联免疫分析法(ELISA)、免疫传感器法(immunosensor)等。

Schmidt等制备了抗IVM的单克隆抗体，可以同时识别IVM和AVM，标准曲线的50%抑制率时的待测物浓度IC50分别为3μg/kg和7ug/kg，然而该抗体并没有作进一步的研究。Crooks等用结构改造后的IVM免疫兔子，制备了抗IVM的多克隆抗体，并以此建立了竞争ELISA方法，用于牛肝样品中IVM的检测。该方法LOD为1.6ng/g，批内和批间RSD分别为8.8%和14.6%。该ELISA方法与HPLC分析结果高度符合(r=0.99)。杨君宏等建立了一种间接竞争ELISA方法，检测牛组织中的AVMs残留。该方法可同时检测牛肝脏和肌肉中的AVM、IVM和EPR残留。该方法IC50为4.8ng/mL，线性范围为1.1～21.9ng/mL；以20ng/mL、50ng/mL和100ng/g浓度添加时，回收率为53.8%～80.4%，CV为3.4%～17.9%；以5ng/mL、10ng/mL和20ng/g浓度添加时，回收率为70.9%～108.6%，CV为3.7%～17.1%。

Samsonova等利用IVM的单克隆抗体研制了基于表面等离子体共振(SPR)的光学生物传感器，并用于牛奶中IVM的检测。样品用乙腈提取后，经C8柱净化后，用该免疫传感器检测。该方法LOD为16.2ng/mL；在100和50ng/mL添加浓度的回收率分别为102.6%和103%。McGarrity等研发了一种基于竞争性化学发光免疫分析的生物芯片，并用于EPR、AVM、IVM和DOR等的筛查。该芯片固体支持物和容器是包含离散测试位点的生物芯片阵列，点样后可用半自动的台式分析仪检测。牛奶中该方法的LOD为0.3～2ppb，组织为0.15～6.5ppb；回收率在71%～135%之间。

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